cy7通道（cy7通道波长）

本文目录一览：

• 1、常用facscantoⅡ流式细胞仪配有哪几条激光通道
• 2、pe和pecy7需要补偿吗
• 3、如何选择适合的流式抗体(五):举例
• 4、流式细胞术

常用facscantoⅡ流式细胞仪配有哪几条激光通道

1、一般的2激光配置，都是红蓝 ，5 种在蓝色激发光，3种位于红色通道（5-3）和（4-2）没有本质上的区别。到底采用什么配置，取决于你们实验室要做什么实验。配了用不到的是浪费，没有要要用到的也是浪费。所以建议你们把要经常检测的荧光种类，所要使用的通道都事先统计一下，再做决定。

pe和pecy7需要补偿吗

该通道需要补偿。在进行多荧光染色实验时，流式荧光通道之间需要进行补偿调节，以消除不同荧光染料发射的荧光信号之间的重叠。对于PE通道来说，除了检测到PE荧光信号外，还会接收到FITC、PE-eFluor6PE-cy5和PE-cy7等荧光信号，因此需要通过补偿调节来准确反映PE荧光信号的强度。

做补偿调节，需要以下的样本，无任何染色的样本，分别是FITC，PE，PerCP还有APC单染阳性的样本，所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代，你需要画出这四个颜色两两配对的散点图，比如FITC-PE，FITC-PerCP，FITC-APC，PE-PerCP，PE-APC，PerCP-APC，这一共6个散点图。

它不但能象待测的样本细胞一样在同样的实验条件下固定、破膜等，操作起来很简单，灵敏度高，一致性好，使补偿更轻松更准确，而且最难得的是它最适合于多色分析（如五色、六色、七色等）和复合荧光素（如PE-CyAPC-Cy7等），因为这时的补偿往往难度较大。各型号的流式仪器均能使用。

PE-Cy7是一种复合荧光素。由PE和Cy7这两种荧光素通过共价结合在一起。荧光素在受到适当波长的光线照射时，会释放出波长比照射光长的光，这个现象叫做荧光。激发光和释放光波长的差异是每种荧光素的分子特性所决定的。PE的最佳激发光在560纳米，而最强释放光在570纳米左右。

如何选择适合的流式抗体(五):举例

搭配流式荧光素有2个原则：每个通道只能选择1种荧光素；各个通道之间的荧光素可以随意搭配，但需注意 每个通道只能选择1种荧光素。

第三荧光的颜色选择一是你的流式仪一定要能读，二是跟你需要counterstain的其他流式抗体错开频率。第四抗体的球蛋白亚型。因为要根据这个选择isotype对照用抗体。其实严格来说不光亚型一样，浓度也要一样，每个抗体分子携带的荧光分子数量也要一样才行。

尽量使用已经用荧光素标记好的单克隆抗体。如果是单色实验，荧光素的亮度越强越好，比如标记了APC的抗体就要比标记了pacific blue的在相同抗原量，抗体用量相同的情况下，要亮很多 如果是多色实验，除了不要使用光谱重叠度高的荧光素以外，还要搭配染色指数。

单抗体。根据查询中国医学研究网显示，流式检测，都是要使用单抗。单抗的特异性好，染色后的荧光强度和抗原表达水平是线性关系，不同批次间的变化较少。

使用流式细胞仪进行检测用的抗体，一般是抗体和荧光的偶联物。

流式细胞术

质谱流式细胞仪由多伦多大学的研究人员首先研发出来，第一台商品化的质谱流式细胞仪名为Cytometry by Time-Of-Flight （CyTOF），相关抗体试剂由DVS Sciences公司生产和销售。

流式细胞术是一种生物学技术，用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。流式细胞术（Flow CytoMetry，FCM）是对悬液中的单细胞或其他生物粒子，通过检测标记的荧光信号，实现高速、逐一的细胞定量分析和分选的技术。

流式细胞术能在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，具有速度快、精度高、准确性好的优点。

在流式细胞术测量中，常用的是两种散射方向的散射光测量：①前向角（即0角）散射（FSC）；②侧向散射（SSC），又称90角散射。这时所说的角度指的是激光束照射方向与收集散射光信号的光电倍增管轴向方向之间大致所成的角度。